付丽丽，金晶，吉美萍，那日，郭九峰

2结果与讨论

2.1提取剂的选择

A（90%乙醇）、B（900/0丙酮）、C（90%乙醇-90qo丙酮）(1：1)、D（90%乙醇-90010丙酮）(1：2)、E（900/0乙醇-90%丙酮）(2：1)对钝顶螺旋藻干粉叶绿素a提取率的影响见图1。

由图1可知，90%乙醇-90010丙酮(1：1)的叶绿素a的提取率最高，其值为1. 358%；不同试剂浸提钝顶螺旋藻叶绿素a的提取率依次为90%乙醇-90%丙酮(1：1)>90%乙醇-90qo丙酮(1：2)>90%乙醇-90qo丙酮(2:1)>900/0乙醇>90%丙酮。表明，两种试剂混合的浸提效果好于单一试剂，且90 010乙醇-90 010丙酮(1：1)的浸提效果最好，选为超声法提取钝顶螺旋藻叶绿素a的提取剂。

2.2单因素实验

2. 2.1  固液比对提取率的影响称取0.020 g的钝顶螺旋藻干粉于离心管中，加入90%乙醇-90%丙酮(1：1)，超声功率60%，超声时间20 min，固液比对叶绿素a提取率的影响见图2。

由图2可知，随着固液比的增大，叶绿素a提取率先增大后减小。当固液比为1：500( g/mL)时，叶绿素a提取率最高，达到1. 448%。因此，最佳固液比为1：500( g/mL)。

2. 2.2超声功率对提取率的影响  称取0.020 g的钝顶螺旋藻干粉于离心管中，加入10 mL 90%乙醇-90%丙酮(1：1)，超声时间20 min。超声功率对叶绿素a提取率的影响见图3。

由图3可知，随着超声功率的增大，叶绿素a提取率先增大后减小，当超声功率为80%时，叶绿素a提取率最高为1. 479%。

2.2.3  超声时间对提取率的影响  称取0. 020 g的钝顶螺旋藻干粉于离心管中，加入10 mL 90%乙醇-90 010丙酮(1：1)，超声功率60%，超声时间对叶绿素a提取率的影响见图4。

由图4可知，随着超声时间的增加，叶绿素a提取率先增加后减小，当时间为20 min时效果最佳，叶绿素a提取率达到1. 419%。

2.3正交实验结果

以单因素实验为基础，进行正交实验^[6-7]，考察固液比、超声功率、超声时间对钝顶螺旋藻干粉叶绿素a提取率的影响。因素与水平见表1，结果见表2。

由表2可知，各因素对提取率的影响依次为超声功率>固液比>超声时间，最优组合为B₂A₂ C₃，即超声功率80%，固液比1：500( g/mL)，超声时间20 min时，叶绿素a提取率最高，达到1.545%。

由表3可知，超声功率对提取率的影响极显著(P<0.01)，固液比对提取率的影响显著(P<0. 05)，超声时间无显著性影响。

有报道^[8]采用响应面法优化螺旋藻中叶绿素的超声提取工艺中，叶绿素提取率为1. 280%。可看出，本实验采用的优化条件得到的结果比此报道中的叶绿素提取率高出20. 7%，达到了较好的效果，该方法不但提取率高，且成本低、耗时短，可作为提取钝顶螺旋藻叶绿素a的一种有效方法。

3结论

超声法提取钝顶螺旋藻干粉叶绿素a的最优条件为：固液比1：500( g/mL)，超声功率80%，超声时间20 min。该条件下，钝顶螺旋藻叶绿素a的提取率达1. 545%。其中超声功率对a提取率的影响极显著，固液比对提取率的影响显著。

     本文《钝顶螺旋藻干粉叶绿素a提取方法探讨》，文章刊登于《应用化工》 ISTIC -2015年12期，作者：付丽丽，金晶，吉美萍，那日，郭九峰。详细信息见原文。